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Inertsil DIOL色譜柱操作說(shuō)明

更新時(shí)間:2024-11-01      點(diǎn)擊次數(shù):661

1.色譜柱信息

  Inertsil Diol是在高純度硅膠基質(zhì)上鍵合二羥丙基的色譜柱,正相模式下,比單純的硅膠柱對(duì)化合物的選擇性更強(qiáng),可以實(shí)現(xiàn)極性接近的化合物群的分離,主要用于一些脂溶性、中等極性或者極性較大的非離子性化合物的分離。Inertsil Diol液相色譜柱從硅膠基質(zhì)的合成,到化學(xué)處理和裝填后的性能檢測(cè),都是在本公司嚴(yán)格的產(chǎn)品控制下進(jìn)行,因此不同批次的柱與柱之間具有優(yōu)異的重現(xiàn)性;通過(guò)獨(dú)有的裝填技術(shù)填裝的氰基柱柱床密度均一穩(wěn)定,從而確保色譜柱具有高柱效。

  為了能長(zhǎng)期保持Inertsil® Diol液相色譜柱的優(yōu)越性能和正確的使用色譜柱,在使用色譜柱之前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書。

 

2.使用前的檢查與須知事項(xiàng)

檢查包裝箱的外觀有無(wú)異常。

●打開(kāi)包裝,檢查色譜柱的填料名稱、尺寸規(guī)格、連接形式是否相符。

●色譜柱中封存流動(dòng)相為正己烷/乙醇=982,v/v。

 

3.色譜柱填料規(guī)格

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4.色譜柱安裝與操作

  色譜柱在運(yùn)輸過(guò)程中,兩端用堵頭密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí),首先請(qǐng)確保系統(tǒng)中的溶劑和液相柱中封存溶劑是互溶的。如果不能互溶,請(qǐng)采用一種能夠與系統(tǒng)及色譜柱都能互溶的溶劑(e.g.異丙醇)對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行充分過(guò)渡之后再將色譜柱連接到系統(tǒng)中,并注意流動(dòng)相的方向要與柱上標(biāo)記的方向保持一致。我公司提供的常規(guī)液相色譜柱標(biāo)準(zhǔn)接頭型式為

1/16英寸Waters接頭螺絲型(如下左圖),同時(shí)還有耐高壓液相系統(tǒng)的UP(如下右圖)(目前Diol柱暫不提供UPLC)。如果需要其他接頭形式請(qǐng)另行咨詢。

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  色譜柱連接好之后,請(qǐng)確認(rèn)無(wú)漏液現(xiàn)象之后再進(jìn)行后續(xù)操作。

  新的Diol柱是保存在正己烷/乙醇(982,v/v)的溶液中,在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中,硅膠填料可能會(huì)干涸,用于正相分離模式,正相柱的平衡時(shí)間一般較長(zhǎng),直接用正己烷/乙醇(982,v/v)沖洗至少50倍柱體積活化,流速?gòu)?/span>0.1mL/min緩慢上升到最佳流速,然后用流動(dòng)相平衡之后再進(jìn)樣分析(如果在活化過(guò)程中即發(fā)現(xiàn)壓力和基線不正常時(shí),請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系我公司工程

師處理。)

 

5.樣品與流動(dòng)相

  為避免色譜柱堵塞,所有樣品及溶劑,包括緩沖溶液在內(nèi),在使用前必須用0.45μm或者0.22 μm的濾膜過(guò)濾。在正相色譜中,固定相的水分含量常常是影響選擇性的關(guān)鍵因素,大部分溶劑都內(nèi)含有小部分的溶解水分(正己烷20℃水分含量是0.0111% w/w),如發(fā)現(xiàn)色譜柱保留性能發(fā)生變化,可用流動(dòng)相低流速長(zhǎng)時(shí)間充分平衡。

 

6.色譜柱的保養(yǎng)

pH Diol柱可在pH2~7.5范圍內(nèi)使用,為保持色譜柱良好的壽命,請(qǐng)避免較強(qiáng)的酸或堿性樣品或者流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱。

耐壓 常規(guī)柱耐受壓力為20MPa,HP系列耐壓為50MPa,但是正常的壓力建議控制在耐受壓力的2/3以下。長(zhǎng)時(shí)間在高壓下運(yùn)行會(huì)對(duì)色譜柱造成難以修復(fù)的損害,因此系統(tǒng)壓力升高之后,建議盡快排查系統(tǒng),如果是色譜柱壓力升高,請(qǐng)及時(shí)采用適當(dāng)溶劑沖洗色譜柱。

溫度 最高操作溫度為60℃,長(zhǎng)時(shí)間在高溫下操作會(huì)顯著降低色譜柱壽命。

沖洗

正相模式清洗步驟:

1.每次清洗都用低流速起步,當(dāng)檢測(cè)到柱壓穩(wěn)定在一定水平后再增加流速;

2.先用10倍柱體積不含其它添加劑的流動(dòng)相中的弱溶劑,如正己烷、氯仿等沖洗色譜柱;

3.50柱體積的諸如乙酸乙酯,二氯甲烷或異丙醇等流動(dòng)相中的強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱。

此外,也可以根據(jù)樣品基質(zhì)特點(diǎn),選擇對(duì)基質(zhì)溶解性較強(qiáng)的溶劑沖洗。

儲(chǔ)存 色譜柱長(zhǎng)期不用,建議沖洗方法完成之后,正相分離模式保存在與出廠封存溶劑相同的流動(dòng)相中;之后卸掉色譜柱,兩端用堵頭密封,并放在溫度變化小的場(chǎng)所。


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